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    蛋白表達系統的含義及主要構成分析

    更新時間:2020-10-22點擊次數:1523
       蛋白表達系統是指由宿主、外源基因、載體和輔助成分組成的體系。通過這個體系可以實現外源基因在宿主中表達的目的。
      蛋白表達一般由以下幾個部分組成:
      1.宿主:表達蛋白的生物體。可以為細菌、酵母、植物細胞、動物細胞等。由于各種生物的特性不同,適合表達蛋白的種類也不相同;
      2.載體:載體的種類與宿主相匹配。根據宿主不同,分為原核(細菌)表達載體、酵母表達載體、植物表達載體、哺乳動物表達載體、昆蟲表達載體等。載體中含有外源基因片段。通過載體介導,外源基因可以在宿主中表達;
      3.輔助成分:有的表達系統中還包括了協助載體進入宿主的輔助成分。比如昆蟲-桿狀病毒表達體系中的桿狀病毒。
      對于一個蛋白來說:
      首先了解該蛋白的基本信息,獲得序列信息,了解構成情況。
      然后再對蛋白序列進行生物信息學分析:
      1.是否含有稀有密碼子;
      2.是否有二硫鍵;
      3.是否含有信號肽;
      4.磷酸化和糖基化位點。
      再構建載體在不同的菌株中表達,同時嘗試不同的誘導條件,包括:誘導時OD值、誘導溫度、誘導時間、分析表達結果。同時進行細菌生長曲線作圖,觀察目的蛋白對宿主菌是否有毒害作用。通過終的表達結果分析過程。
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