多克隆抗體制備關于抗體的鑒定說明

　　1.制備抗原；

　　2.選擇實驗動物；

　　3.動物免疫；

　　4.試取血進行測試，看看是否成功免疫；

　　5.如果成功免疫，殺死實驗動物，將血清全部采集；

　　6.純化出抗體；

　　7.鑒定抗體，包括純度以及特異性。

　　多克隆抗體制備的抗體鑒定說明：

　　1.抗體的效價鑒定

　　不管是用于診斷還是用于治療，制備抗體的目的都是要求較高效價。不同的抗原制備的抗體，要求的效價不一。鑒定效價的方法很多，包括有試管凝集反應、瓊脂擴散試驗、酶聯免疫吸附試驗（ELISA)等。常用的抗原所制備的抗體一般都有約成的鑒定效價的方法，以資比較。如制備抗抗體的效價，一般就采用瓊脂擴散試驗來鑒定。

　　2.抗體的特異性鑒定

　　抗體的特異性是指與相應抗原或近似抗原物質的識別能力?？贵w的特異性高，它的識別能力就強。衡量特異性通常以交叉反應率來表示。交叉反應率可用競爭抑制試驗測定。以不同濃度抗原和近似抗原分別做競爭抑制曲線，計算各自的結合率，求出各自在IC50時的濃度，并按相關公式計算交叉反應率。如果所用抗原濃度IC50濃度為pg/管，而一些近似抗原物質的IC50濃度幾乎是無窮大時，表示這一抗血清與其他抗原物質的交叉反應率近似為0，即該血清的特異性較好。

　　抗體的親和力是指抗體和抗原結合的牢固程度。親和力的高低是由抗原分子的大小、抗體分子的結合位點與抗原決定簇之間立體構型的合適度決定的。有助于維持抗原抗體復合物穩定的分子間力有氫鍵、疏水鍵、側鏈相反電荷基因的庫侖力、范德華力和空間斥力。親和力常以親和常數K表示，K的單位是L/mol，通常K的范圍在108-1010/mol，也有多達1014/mol?？贵w親和力的測定對抗體的篩選，確定抗體的用途，驗證抗體的均一性等均有重要意義。