內(nèi)化抗體篩選

　抗體或肽段可與哺乳動(dòng)物細(xì)胞表面的受體特異性結(jié)合，通過(guò)受體介導(dǎo)的胞吞作用進(jìn)入到細(xì)胞內(nèi)，此類抗體或抗體片段被稱為內(nèi)化抗體。內(nèi)化抗體往往作為一種定向運(yùn)載藥物、毒素、酶或者DNA的載體，取得廣泛的應(yīng)用。

　　艾柏森生物科技有限公司可為客戶提供基于絲狀噬菌體和T7λ噬菌體，構(gòu)建噬菌體展示抗體庫(kù)和肽庫(kù)，進(jìn)行內(nèi)化抗體的高通量篩選服務(wù)：

★　技術(shù)流程：

1.　構(gòu)建抗某種膜蛋白受體的次級(jí)抗體庫(kù)；

2.　將新鮮制備的、約1011噬菌體抗體與陰性細(xì)胞（膜蛋白受體-）相混合并孵育一定時(shí)間，以去除抗體庫(kù)中能夠與膜蛋白受體相結(jié)合的非特異性抗體；

3.　孵育混合物的上清再與陽(yáng)性細(xì)胞（膜蛋白受體+）共同孵育，用*培養(yǎng)液多次洗滌細(xì)胞；

4.　將細(xì)胞重懸于適量的培養(yǎng)液中，置于細(xì)胞培養(yǎng)箱，適宜溫度下孵育一段時(shí)間，讓結(jié)合于細(xì)胞表面的噬菌體抗體內(nèi)化；

5.　用緩沖液洗滌細(xì)胞，去除未內(nèi)化但仍結(jié)合于細(xì)胞上的噬菌體抗體

6.　凍融并超聲破碎細(xì)胞，胰酶消化被內(nèi)化的噬菌體，感染大腸桿菌，進(jìn)行下一輪的擴(kuò)增和篩選。

艾柏森生物科技有限公司可為客戶提供多種受體的內(nèi)化抗體的篩選服務(wù)：EGFR,CTLA4,HER2,CD20,CD3,CD59,CD33等