重組IgG制備

隨著重組蛋白技術(shù)的進(jìn)一步完善，真核哺乳動物細(xì)胞蛋白表達(dá)系統(tǒng)憑著蛋白折疊和完善的翻譯后休息系統(tǒng)，表達(dá)的抗體更接近天然構(gòu)象，從而具有和天然抗體相同的生物活性，因此常用于功能蛋白、抗體及臨床疫苗的生產(chǎn)。艾柏森生物提供工業(yè)級別重組IgG、Fab和ScFv等抗體片段的制備和純化服務(wù)。

瞬時轉(zhuǎn)染表達(dá)

瞬時轉(zhuǎn)染（transienttransfection）是將重組抗體基因?qū)胝婧思?xì)胞的方式之一。在瞬時轉(zhuǎn)染中，重組DNA導(dǎo)入感染性強(qiáng)的細(xì)胞系以獲得目的基因暫時但高水平的表達(dá)。轉(zhuǎn)染的DNA不必整合到宿主染色體，可在比穩(wěn)定轉(zhuǎn)染較短時間內(nèi)收獲轉(zhuǎn)染的細(xì)胞，并對溶解產(chǎn)物中目的基因的表達(dá)進(jìn)行檢測。艾柏森提供從基因優(yōu)化、載體構(gòu)建、瞬轉(zhuǎn)HEK293細(xì)胞/CHO細(xì)胞、表達(dá)純化小試以及大規(guī)模發(fā)酵服務(wù)。可以短時間內(nèi)生產(chǎn)mg至g級重組IgG。

構(gòu)建穩(wěn)定細(xì)胞系

構(gòu)建目的基因的表達(dá)質(zhì)粒后，可通過電轉(zhuǎn)、慢病毒轉(zhuǎn)染等方法，將質(zhì)粒轉(zhuǎn)染至宿主細(xì)胞。選用DHFR /GS基因表達(dá)系統(tǒng),將轉(zhuǎn)染的細(xì)胞培養(yǎng)在合適的選擇性培養(yǎng)基中，然后進(jìn)行MTX/MSX壓力篩選,以產(chǎn)生穩(wěn)定細(xì)胞庫。

艾柏森生物使用MolecularClonePix2系統(tǒng),高通量、自動化的篩選出100-200個高水平分泌克隆，并從中挑選10-20個高產(chǎn)克隆，進(jìn)行下一步的穩(wěn)定性測試。我們挑選出10個克隆，進(jìn)行10次傳代后，qPCR和WB法檢測細(xì)胞株的穩(wěn)定性。我們提供序列及載體報告, 3株表達(dá)的細(xì)胞株，表達(dá)分析、穩(wěn)定性測試報告以及詳細(xì)的穩(wěn)定細(xì)胞株構(gòu)建報告。

IgG構(gòu)建服務(wù)簡介

VL和VH基因片段的密碼子優(yōu)化和基因合成

表1 噬菌體展示技術(shù)服務(wù)項目：IgG的重組表達(dá)生產(chǎn)