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    Northern Blot實驗外包

    產品簡介

    Northern Blot或稱RNA印跡,是通過測定樣品中的RNA以檢測基因表達的分子生物學操作。通過檢測細胞分化過程中或細胞在不同環境條件下特定基因的表達情況可觀察到細胞調控或了解細胞功能等。

    產品型號:
    更新時間:2020-05-14
    廠商性質:代理商
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    或稱RNA印跡,是通過測定樣品中的RNA以檢測基因表達的分子生物學操作。通過檢測細胞分化過程中或細胞在不同環境條件下特定基因的表達情況可觀察到細胞調控或了解細胞功能等。

     

    Northern blotting技術流程包括采用電泳分離RNA,隨后通過與目的RNA互補的雜交探針進行對目的RNA的檢測。由于核算帶負電荷,因此帶有正電荷的聚酰胺膜有較高的膜轉移效率。并且轉移緩沖液常含有甲酰胺,其可降低探針和RNA結合所需溫度,因此可降低RNA在高溫下變性的風險。RNA轉移到膜后,通過UV或加熱可與膜進行共價結合。隨后加入已標記的探針進行探針和目的RNA的片段的雜交,并進行膜的洗滌以洗去未特異性結合的探針已消除背景。后,雜交信號可被X-ray檢測并且進行定量。

     

    操作流程大致如下:

    1.        RNA的提取

    2.        電泳

    3.        將RNA從變性膠轉移到硝酸纖維素膜或尼龍膜

    4.        UV或熱固定法將RNA固定到膜上

    5.        探針標記

    6.        雜交,洗膜

    7.        圖像分析

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