RNA pull down實(shí)驗(yàn)

RNA pull down實(shí)驗(yàn) 檢測(cè)RNA結(jié)合蛋白與其靶RNA之間的相互作用。使用體外轉(zhuǎn)錄法標(biāo)記生物素RNA探針，然后與胞漿蛋白提取液孵育，形成RNA-蛋白質(zhì)復(fù)合物。該復(fù)合物可與鏈親和素標(biāo)記的磁珠結(jié)合，從而與孵育液中的其他成分分離。復(fù)合物洗脫后，通過(guò)western blot實(shí)驗(yàn)檢測(cè)特定的RNA結(jié)合蛋白是否與RNA相互作用。

實(shí)驗(yàn)流程

1.        目標(biāo)RNA生物素標(biāo)記

2.        磁珠富集RNA

3.        RNA結(jié)合蛋白孵育

4.        RNA結(jié)合蛋白洗脫

5.        WB或者M(jìn)S檢測(cè)

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