免疫共沉淀實驗

免疫共沉淀（Co-Immunoprecipitation）是以抗體和抗原之間的專一性作用為基礎的用于研究蛋白質相互作用的經(jīng)典方法。是確定兩種蛋白質在完整細胞內生理性相互作用的有效方法。

其原理是：當細胞在非變性條件下被裂解時，完整細胞內存在的許多蛋白質－蛋白質間的相互作用被保留了下來。如果用蛋白質X的抗體免疫沉淀X，那么與X在體內結合的蛋白質Y也能沉淀下來。目前多用精制的prorein A預先結合固化在argarose的beads上，使之與含有抗原的溶液及抗體反應后，beads上的prorein A就能吸附抗原達到精制的目的。這種方法常用于測定兩種目標蛋白質是否在體內結合；也可用于確定一種特定蛋白質的新的作用搭檔。

基本流程是：細胞裂解液中加入抗體，與抗原形成特異免疫復合物，經(jīng)過洗脫，收集免疫復合物，然后進行SDS-PAGE及Western blotting分析。

服務流程

1.        構建含有目的基因的表達質粒

2.        共轉細胞

3.        裂解細胞并加入誘餌蛋白的抗體，孵育

4.        加入protein A或G以與抗體特異性結合于Agarose珠

5.        SDS-PAGE; Western Blot