ELISA/Elispot實驗

酶聯(lián)免疫吸附測定enzyme linked immunosorbent assay（ELISA）指將可溶性的抗原或抗體結合到聚苯乙烯等固相載體上，利用抗原抗體結合專一性進行免疫反應的定性和定量檢測方法。分為夾心法，間接法和競爭法三種。

雙抗夾心是檢測抗原常用的方法，操作流程：

1.        將特異性抗體與固相載體連接形成固相抗體：洗滌除去未結合的抗體及雜質　　

2.        加受檢標本：使之與固相抗體接觸反應一段時間讓標本中的抗原與固相載體上的抗體結合形成固相抗原復合物，洗滌除去其他未結合的物質　　

3.        加酶標抗體：使固相免疫復合物上的抗原與酶標抗體結合，*洗滌未結合的酶標抗體　

4.        加底物：夾心式復合物中的酶催化底物成為有色產物根據(jù)顏色反應的程度進行該抗原的定性或定量　

酶聯(lián)免疫斑點檢測（Enzyme-linked Immunospot Assay，ELISPOT）法源自ELISA，又突破傳統(tǒng)ELISA法，是定量ELISA技術的延伸和新的發(fā)展。原理：用抗體捕獲培養(yǎng)中的細胞分泌的細胞因子，并以酶聯(lián)斑點顯色的方式將其表現(xiàn)出來。