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    慢病毒轉染穩轉細胞系構建

    產品簡介

    慢病毒構建并包裝后,以進行貼壁細胞或懸浮細胞的轉染。具體流程如下:

    1. 對慢病毒基因進行改造,即敲除U3端的400bp的特定基因,使其逆轉錄和整合的能力,但保留產生病毒顆粒必須的蛋白的能力。

    2. 向上述基因中插入目的基因。與具有包裝功能的質粒同時進行對包裝細胞的轉染。在細胞上清中獲得攜帶目的基因的復制缺陷型慢病毒載體顆粒。

    產品型號:
    更新時間:2020-05-14
    廠商性質:代理商
    訪問量:3812
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    慢病毒構建并包裝后,以進行貼壁細胞或懸浮細胞的轉染。具體流程如下:

    1.    對慢病毒基因進行改造,即敲除U3端的400bp的特定基因,使其逆轉錄和整合的能力,但保留產生病毒顆粒必須的蛋白的能力。

    2.    向上述基因中插入目的基因。與具有包裝功能的質粒同時進行對包裝細胞的轉染。在細胞上清中獲得攜帶目的基因的復制缺陷型慢病毒載體顆粒。

    3.    使用上述獲得的慢病毒顆粒轉染目的細胞。

    4.    根據慢病毒攜帶的標記基因,轉染得到的細胞進行熒光蛋白檢測或加入抗生素進行細胞篩選。

    5.  熒光性強或者克隆數多的細胞系加以傳代培養并保存。

     

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